原花青素值的測(cè)定方法

        方法提要樣品經(jīng)甲醇溶解后，采用紫外 - 可見(jiàn)分光光度計(jì)法測(cè)定。

        儀器和用具

        分析天平，感量為 0.01mg。

        紫外 - 可見(jiàn)分光光度計(jì)。

        超聲波清洗器

        頂空瓶和壓蓋器

        試劑和溶液

        甲醇，分析純。

        鹽酸，分析純。

        正丁醇（n-BuOH），分析純。

        硫酸鐵銨，分析純。

        水。

        65% 鹽酸 - 正丁醇（V/V）溶液：在一個(gè) 100mL 容量瓶中加入大約 2/3 體積的正丁醇，量取 5.0mL鹽酸加入，放冷至室溫，并用正丁醇定容至刻度，搖勻。溶液可穩(wěn)定保存一個(gè)月。

        72% 硫酸鐵銨溶液：稱(chēng)取 2.0g 硫酸鐵銨，置 100mL 容量瓶中，加入 2mol/L 鹽酸溶解，放冷至室溫，用 2mol/L 鹽酸定容至刻度，搖勻。溶液可穩(wěn)定保存 6 個(gè)月。

        操作方法

        供試品溶液制備精密稱(chēng)取供試品約 10mg，置于 100mL 棕色容量瓶中，加入 80mL 甲醇，超聲溶解，用甲醇定容至刻度，搖勻，即得供試品溶液。

        測(cè)定方法

        精密移取下列溶液至 10mL 頂空瓶中

        1.0mL 供試品溶液；

        6.0mL 5% 的鹽酸 - 正丁醇溶液；

        0.2mL 2% 硫酸鐵銨溶液；

        蓋上頂空瓶的蓋和墊，用壓蓋器（封口鉗）封口，將頂空瓶放于水?。?00±2°C）鍋中（瓶中試劑部分應(yīng)處于水面以下），水浴 40 分鐘，取出，在冷水?。? ～ 10°C）中迅速冷卻 20 分鐘。

        試劑空白：照上述方法精密移取 1mL 甲醇，6mL 鹽酸 - 正丁醇和 0.2mL 硫酸鐵銨溶液于 10mL 頂空瓶中，同法制備一個(gè)試劑空白。

        用試劑空白作對(duì)照，在 546nm 處測(cè)定供試品溶液的吸光度 。